书 书 书犐犆犛 ６７ ． ０６０ 犡 ０４ 　 中华人民共和国国家标准 犌犅 ／ 犜 ２７９５ — ２００８ 代替 ＧＢ ／ Ｔ２７９５ — １９８１ 冻兔肉中有机氯及拟除虫菊酯类农药 残留的测定方法 　 气相色谱 ／ 质谱法 犕犲狋犺狅犱犳狅狉犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狅狉犵犪狀狅犮犺犾狅狉犻狀犲犪狀犱狆狔狉犲狋犺狉狅犻犱犘犲狊狋犻犮犻犱犲 犿狌犾狋犻狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀狉犪犫犫犻狋狋犻狊狊狌犲狊 — 犌犆犕犛犿犲狋犺狅犱 ２００８  ０９  １０ 发布 ２００９  ０１  ０１ 实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布书 书 书前 　　 言 　　 本标准代替 ＧＢ ／ Ｔ２７９５ — １９８１ 《 出口冻兔肉六六六 、 滴滴涕残留量检验方法 》。 本标准与 ＧＢ ／ Ｔ２７９５ — １９８１ 相比主要区别如下 ： ——— 将原方法中的被分析物六六六 、 滴滴涕 ８ 种扩大到 ２４ 种有机氯 、 ３ 种杀螨剂和 １４ 种拟除虫菊 酯类农药 ； ——— 将填充柱更换为毛细柱 ； ——— 气相色谱  质谱同时确证和测定代替气相色谱  电子捕获检测器测定 ； ——— 方法的样品净化处理采用凝胶渗透色谱和固相萃取代替原方法的磺化处理法 。 本标准的附录 Ａ 、 附录 Ｂ 、 附录 Ｃ 均为资料性附录 。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口 。 本标准起草单位 ： 中华人民共和国天津出入境检验检疫局 。 本标准主要起草人 ： 王云凤 、 葛宝坤 、 陈其勇 、 常春艳 、 高建会 、 王伟 、 宓捷波 、 刘有序 、 彭杨思 、 刘 、 赵孔祥 。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为 ： ——— ＧＢ ／ Ｔ２７９５ — １９８１ 。 Ⅰ 犌犅 ／ 犜 ２７９５ — ２００８ 冻兔肉中有机氯及拟除虫菊酯类农药 残留的测定方法 　 气相色谱 ／ 质谱法 １ 　 范围 本标准规定了冻兔肉中 ４１ 种有机氯及拟除虫菊酯类农药残留量气相色谱 ／ 质谱的测定方法 。 本标准适用于冻兔肉中 α  ６６６ 、 β  ６６６ 、 林丹 、 δ  ６６６ 、 狅 ， 狆′ 滴滴滴 、 狆 ， 狆′ 滴滴伊 、 狆 ， 狆′ 滴滴涕 、 狅 ， 狆′ 滴滴涕 、 七氯 、 环氧七氯 、 艾氏剂 、 狄氏剂 、 异狄氏剂 、 氯丹 、 四氯硝基苯 、 五氯硝基苯 、 α  硫丹 、 β  硫丹 、 硫 丹硫酸盐 、 六氯苯 、 甲氧滴滴涕 、 氯菊酯 、 溴氰菊酯 、 氰戊菊酯 、 Ｓ 氰戊菊酯 、 甲氰菊酯 、 联苯菊酯 、 氯氰菊 酯 、 胺菊酯 、 三氟氯氰菊酯 、 醚菊酯 、 氟氯氰菊酯 、 氟氰戊菊酯 、 苯醚菊酯 、 生物苄夫菊酯 、 乙酯杀螨醇 、 三 氯杀螨醇 、 三氯杀螨砜 、 氯杀螨 、 杀螨特 、 溴螨酯 ４１ 种农药残留量的测定 。 ２ 　 原理 试样用环己烷 ＋ 乙酸乙酯混合溶剂均质提取 ， 提取液浓缩后经凝胶渗透色谱和固相萃取净化 ， 浓 缩 ， 气相色谱  质谱仪检测 ， 外标法定量 。 ３ 　 试剂和材料 所有试剂除另有说明外 ， 均为色谱纯 ， 水为二次蒸馏水 。 ３ ． １ 　 乙腈 。 ３ ． ２ 　 环己烷 。 ３ ． ３ 　 乙酸乙酯 。 ３ ． ４ 　 环己烷 ＋ 乙酸乙酯混合溶剂 （ １＋１ ， 体积比 ）。 ３ ． ５ 　 正己烷 。 ３ ． ６ 　 正己烷饱和的乙腈 ： 向 １００ｍＬ 乙腈中加入 １００ｍＬ 正己烷 ， 充分振摇后 ， 静置分层 ， 取下层乙腈 备用 。 ３ ． ７ 　 甲苯 。 ３ ． ８ 　 丙酮 。 ３ ． ９ 　 无水硫酸钠 ， 分析纯 ： 用前在 ６５０℃ 灼烧 ４ｈ ， 储存于干燥器中 ， 冷却后备用 。 ３ ． １０ 　 中性氧化铝固相萃取小柱 ， ５００ｍｇ ， ３ｍＬ 或相当者 ： 用前使用 ２ｍＬ 正己烷饱和的乙腈活化 。 ３ ． １１ 　 农药标准物质 ： 纯度 ≥ ９５％ 。 ３ ． １２ 　 标准储备溶液 。 ３ ． １３ 　 准确称取 １０ｍｇ （ 精确至 ０．１ｍｇ ） 各农药标准物 ， 分别置于 １０ｍＬ 容量瓶中 ， 用甲苯溶解并定容 至刻度 。 ３ ． １４ 　 混合标准溶液 按照农药的性质和保留时间 ， 将 ４１ 种农药按照附录 Ａ 中表 Ａ．１ 所规定的浓度分成四组 ， 用甲苯配 制成混合标准溶液 。 混合标准溶液避光 ４℃ 保存 ， 可使用 １ 个月 。 ３ ． １５ 　 基质混合标准工作溶液 按照附录 Ａ 中表 Ａ．１ 所规定的浓度 ， 分别取四组混合标准溶液 ０ 、 ０．０５ 、 ０．１０ 、 ０．２５ 、 ０．５ｍＬ ， 加样 品空白基质提取液并定容至 １．０ｍＬ ， 混匀 ， 配成四组基质混合标准工作溶液 ， 用于绘制标准工作曲线 。 基质混合标准工作溶液使用前配制 。 １ 犌犅 ／ 犜 ２７９５ — ２００８ ４ 　 仪器 ４ ． １ 　 气相色谱  质谱仪 ： 配有电子轰击源 （ ＥＩ ）。 ４ ． ２ 　 凝胶渗透色谱仪 ： 内装 ＢｉｏＢｅａｄｓＳＸ３ 填料的净化柱 。 ４ ． ３ 　 分析天平 ： 感量 ０．１ｍｇ 和 ０．０１ｇ 各一台 。 ４ ． ４ 　 旋转蒸发器 。 ４ ． ５ 　 均质器 ： 最大转速为 ２４０００ｒ ／ ｍｉｎ 。 ４ ． ６ 　 离心机 ： 最大转速为 ５０００ｒ ／ ｍｉｎ 。 ４ ． ７ 　 氮气吹干仪 。 ５ 　 试样制备与保存 样品用绞肉机绞碎 ， 充分混匀 ， 用四分法缩分至不少于 ５００ｇ ， 作为试样 ， 装入清洁器内 ， 加封后 ， 标 明标记 。 试样于 －１８℃ 冷冻保存 。 ６ 　 测定步骤 ６ ． １ 　 提取 称取约 １０ｇ 试样 ， 精确到 ０．０１ｇ ， 放入装有 ２０ｇ 无水硫酸钠 （ ３．９ ） 的 ５０ｍＬ 离心管中 ， 加 ３５ｍＬ 乙 酸乙酯  环己烷混合溶剂 （ ３．４ ）， 均质 １ｍｉｎ ， 把离心管放入离心机中 ， 在 ４０００ｒ ／ ｍｉｎ 离心 ５ｍｉｎ ， 上清液 通过装有无水硫酸钠的漏斗 ， 收集于 １００ｍＬ 鸡心瓶中 ， 离心管中的组织残渣再用 ３５ｍＬ 乙酸乙酯  环 己烷混合溶液 （ ３．４ ） 提取一次 ， 离心后上清液过装有无水硫酸钠的漏斗到上述鸡心瓶中 ， 于 ４０℃ 水浴将 提取液旋转蒸发至约 １ｍＬ ， 浓缩液转移至 ＧＰＣ 自动进样系统的样品管中 ， 用乙酸乙酯  环己烷混合溶 剂 （ ３．４ ） 洗涤旋转蒸发瓶两次 ， 洗涤液合并至样品管中并定容至 １０ｍＬ 。 ６ ． ２ 　 凝胶渗透色谱净化 ６ ． ２ ． １ 　 条件 ａ ） 　 净化柱 ： ２００ｍｍ×２５ｍｍ ， 内装 ＢｉｏＢｅａｄｓＳＸ３ 填料 ； ｂ ） 　 检测波长 ： ２５４ｎｍ ； ｃ ） 　 流动相 ： 乙酸乙酯  环己烷混合溶剂 （ ３．４ ）； ｄ ） 　 流速 ： ４．７ｍＬ ／ ｍｉｎ ； ｅ ） 　 进样量 ： ５ｍＬ ； ｆ ） 　 开始收集时间 ： ７．５ｍｉｎ ； ｇ ） 　 结束收集时间 ： １５ｍｉｎ 。 ６ ． ２ ． ２ 　 净化 样液过滤后通过 ５ｍＬ 样品环注入 ＧＰＣ 柱 ， 收集 ７．５ｍｉｎ ～ １５ｍｉｎ 馏分于 １００ｍＬ 鸡心瓶中 ， 并在 ４０℃ 水浴旋转蒸发至约 １ｍＬ ， 待过氧化铝固相萃取柱 （ ３．１０ ）。 ６ ． ３ 　 固相萃取净化 将上述样液加到已活化的氧化铝固相萃取柱内 ， 用 ５ｍＬ 正己烷饱和的乙腈 （ ３．６ ） 洗脱 ， 收集洗脱 液于 ４０℃ 氮气吹至近干 ， 用 １．０ｍＬ 丙酮溶解残渣 ， 供 ＧＣＭＳ 测定 。 ６ ． ４ 　 测定 ６ ． ４ ． １ 　 气相色谱  质谱条件 ａ ） 　 色谱柱 ： ＤＢ１７０１ （ ３０ｍ×０．２５ｍｍ×０．１５ μ ｍ ） 石英毛细管柱或相当者 ； ｂ ） 　 色谱柱温度 ： ４０℃ 保持 １ｍｉｎ ， 然后以 ３０℃ ／ ｍｉｎ 程序升温至 １３０℃ ， 再以 ５℃ ／ ｍｉｎ 升温至 ２５０℃ ， 再以 １０℃ ／ ｍｉｎ 升温至 ３００℃ ， 保持 ５ｍｉｎ ； ｃ ） 　 载气 ： 氦气 ， 纯度 ≥ ９９．９９９％ ， 流速为 １．０ｍＬ ／ ｍｉｎ ； ２ 犌犅 ／ 犜 ２７９５ — ２００８ ｄ ） 　 进样口温度 ： ２８０℃ ； ｅ ） 　 进样量 ： １ μ Ｌ ； ｆ ） 　 进样方式 ： 不分流进样 ， ０．７５ｍｉｎ 后打开分流阀 ； ｇ ） 　 电子轰击源 ： ７０ｅＶ ； ｈ ） 　 离子源温度 ： １８０℃ ； ｉ ） 　 ＧＣＭＳ 接口温度 ： ２８０℃ ； ｊ ） 　 选择离子监测 ： 按附录 Ａ 选择每种化合物的定量离子和定性离子 ， 每组所有需要检测的离子 按照出峰顺序 ， 分时段分别检测 。 每种化合物的保留时间 、 定量离子 、 定性离子及定量离子与 定性离子的丰度比值参见附录 Ａ ， 每组检测离子的开始时间和驻留时间参见附录 Ｂ 。 ６ ． ４ ． ２ 　 定性测定 四组样品溶液按照气相色谱  质谱测定条件分别测定 。 进行样品测定时 ， 如果检出的色谱峰保留时 间与标准品的保留时间相一致 ， 并且在扣除背景后样品质谱中 ， 所选择的离子均出现 ， 经过对比所选择 离子的丰度比与标准品对应离子的丰度比 ， 其值在表 １ 允许的范围内 ， 则可判断样品中存在对应的被测 物 。 四组标准物质的选择离