ICS71.040.50 G85 中华人民共和国国家标准 GB/T28722—2012 氨 基酸中铁和铅的测定 原子吸收光谱法 Determinationofironandleadinaminoacids—Atomicabsorptionspectrometry 2012-09-03发布 2013-02-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会发布前 言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由中国石油和化学工业联合会提出。 本标准由全国化学标准化技术委员会(SAC/TC63)归口。 本标准起草单位:湖北出入境检验检疫局、浙江省化工研究院有限公司。 本标准主要起草人:崔海容、郭坚、方路、杨顺风、杜文、凌约涛。 ⅠGB/T28722—2012 氨基酸中铁和铅的测定 原子吸收光谱法 1 范围 本标准规定了用原子吸收光谱法测定氨基酸中铁和铅的方法。 本标准适用于氨基酸中铁和铅的测定。石墨炉原子吸收光谱法测铅的检出限为0.005mg/kg;火 焰原子吸收光谱法测铅的检出限为0.1mg/kg、测铁的检出限为2mg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 铅的测定 石墨炉原子吸收光谱法 3.1 原理 试样经灰化或酸消解后,注入原子吸收分光光度计石墨炉中,原子化的铅通过光源发出的光,吸收 其283.3nm共振线,在一定浓度范围,其吸收值与铅含量成正比,与标准系列比较定量。 3.2 试剂 3.2.1 除另有规定外,所用试剂均为优级纯,水为GB/T6682规定的一级水。 3.2.2 硝酸。 3.2.3 高氯酸。 3.2.4 硝酸溶液(0.5mol/L) 取3.2mL硝酸(3.2.2)加入50mL水中,稀释至100mL。 3.2.5 硝酸溶液(1mol/L) 取6.4mL硝酸加入50mL水中,稀释至100mL。 3.2.6 磷酸二氢铵溶液(20g/L) 称取2.0g磷酸二氢铵,以水溶解稀释至100mL。 3.2.7 混合酸[硝酸+高氯酸(4+1)] 取4份硝酸与1份高氯酸混合。 3.2.8 铅标准储备液(1mg/mL) 准确称取1.598g硝酸铅,加10mL0.5mol/L硝酸溶液溶解后定量转移入1000mL容量瓶并定 容。此溶液1mL相当于1mg铅。贮存于聚乙烯瓶内,4℃保存。 3.2.9 铅标准使用液 准确移取1.00mL铅标准储备液于1000mL容量瓶中,用水定容,摇匀后备用。分别移取稀释后 溶液0mL、1.00mL、2.00mL、4.00mL、6.00mL、8.00mL于100mL容量瓶中,加硝酸(0.5mol/L) 1GB/T28722—2012 或硝酸(1mol/L)至刻度。配制成每毫升含0.0ng、10.0ng、20.0ng、40.0ng、60.0ng、80.0ng的铅标 准使用液。 3.3 仪器 3.3.1 原子吸收分光光度计(附石墨炉)。 3.3.2 高温炉。 3.3.3 可调式电热板、可调式电炉。 3.3.4 天平,0.1mg。 3.3.5 实验室常用玻璃仪器,使用前均应以硝酸(1+5)浸泡过夜,并用水洗干净。 3.4 分析步骤 3.4.1 测定次数 对同一试样,至少独立测定两次,取其平均值。 3.4.2 试样消解 可根据实验室条件选用以下任何一种方法消解。 3.4.2.1 干法灰化 称取2.5g试样(精确至0.0001g)于瓷坩埚中,先小火在可调式电热板上炭化至无烟,移入高温 炉于500℃灰化6h~8h,冷却。若试样灰化不彻底,则加1mL混合酸在可调式电炉上小火加热,反 复多次直到消化完全,冷却至室温,用硝酸(0.5mol/L)将灰分溶解,将试样消化液洗入或过滤入(如有 不溶性残渣)25mL容量瓶中,用水少量多次洗涤瓷坩埚,洗液合并于容量瓶中并定容至刻度,混匀备 用;同时做空白试验,空白试验除不加试样外,其他操作与试样相同。 3.4.2.2 湿式消解法 称取2.5g试样(精确至0.0001g)于锥形瓶或高型烧杯中,放数粒玻璃珠并加10mL混合酸,置 于电炉上消解,若变棕黑色,再加混合酸,直至冒白烟,消化液呈无色透明或略带黄色,冷却后将消化液 洗入或过滤入(如有不溶性残渣)25mL容量瓶中,用水少量多次洗涤锥形瓶或高型烧杯,洗液合并于 容量瓶中并定容至刻度,混匀备用;同时做空白试验,空白试验除不加试样外,其他操作与试样相同。 3.4.3 测定 3.4.3.1 仪器条件 根据各自仪器性能调至最佳状态。参考条件为波长283.3nm,狭缝0.2nm~1.0nm,灯电流 5mA~7mA,干燥温度120℃,20s,灰化温度450℃,持续15s~20s,原子化温度1700℃~2300℃, 持续4s~5s,背景校正为氘灯或塞曼效应。 3.4.3.2 基体改进剂的使用 注入适量(5μL)的基体改进剂磷酸二氢铵溶液(20g/L)或与试样同量消除干扰。绘制铅标准曲线 时也要加入与试样测定时等量的基体改进剂磷酸二氢铵溶液。 3.4.3.3 标准曲线绘制 吸取铅标准使用液0ng/mL,10.0ng/mL,20.0ng/mL,40.0ng/mL,60.0ng/mL,80.0ng/mL 2GB/T28722—2012 (或μg/L)各10μL,注入石墨炉,测量其吸光值,以吸光值为纵坐标、浓度为横坐标绘制标准曲线,同时 计算吸光值与浓度关系的一元线性回归方程。 3.4.3.4 试样测定 分别吸取样液和试剂空白液各10μL,注入石墨炉,测得其吸光值,代入标准系列的一元线性回归 方程中求得相应的铅含量。 3.5 结果计算 试样中铅的质量分数按式(1)进行计算。 w=(ρ-ρ0)×V×1000 m×1000×1000……………………(1) 式中: w———试样中铅的质量分数,单位为毫克每千克(mg/kg); ρ———测定样液中铅含量,单位为纳克每毫升(ng/mL); ρ0———空白液中铅含量,单位为纳克每毫升(ng/mL); V———试样消化液定量总体积,单位为毫升(mL); m———试样质量,单位为克(g)。 计算结果保留两位有效数字。 3.6 精密度 在规定条件下,获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20%。 4 铅和铁的测定 火焰原子吸收光谱法 4.1 原理 试样消解后,导入原子吸收分光光度计中,经火焰原子化后,铁、铅分别吸收光源中248.3nm、 283.3nm的共振线,其吸收值与它们的含量成正比,与标准系列比较定量。 4.2 试剂 4.2.1 除另有规定外,所用试剂均为优级纯,水为GB/T6682规定的一级水。 4.2.2 高氯酸。 4.2.3 硝酸。 4.2.4 混合酸[硝酸+高氯酸(4+1)] 取4份硝酸与1份高氯酸混合。 4.2.5 硝酸溶液(0.5mol/L) 取3.2mL硝酸(4.2.3)加入50mL水中,稀释至100mL。 4.2.6 铁标准储备溶液(1mg/mL) 准确称取金属铁(纯度大于99.99%)1g(精确至0.0001g),或含1.0000g纯金属铁相对应的氧 化物,加硝酸溶解并移入1000mL容量瓶中,加0.5mol/L硝酸溶液并稀释至刻度。此溶液1mL相 当于1mg铁。贮存于聚乙烯瓶内,4℃保存。 4.2.7 铅标准储备溶液(1mg/mL) 按照3.2.8配制。 4.2.8 铁、铅标准使用液 3GB/T28722—2012 分别吸取铁、铅标准储备液0mL、0.10mL、0.20mL、0.40mL、0.60mL、0.80mL、1.00mL于 100mL容量瓶中,加硝酸(0.5mol/L)至刻度。稀释成浓度为0μg/mL,1.0μg/mL,2.0μg/mL, 4.0μg/mL,8.0μg/mL,10.0μg/mL的标准使用液。 4.3 仪器 4.3.1 原子吸收分光光度仪。 4.3.2 电热板。 4.3.3 高温炉。 4.3.4 天平,0.1mg。 4.3.5 实验室常用玻璃仪器,使用前均应以硝酸(1+5)浸泡过夜,并用水洗干净。 4.4 分析步骤 4.4.1 测定次数 对同一试样,至少独立测定两次,取其平均值。 4.4.2 试样消解 可根据实验室条件选用以下任何一种方法消解。 4.4.2.1 干法灰化 准确称取2.5g(精确至0.0001g)试样于250mL高型烧杯中,加混合酸消化液20mL~30mL, 盖上表面皿。置于电热板或电炉上进行加热消化。如未消化好而酸液过少,再补加几毫升混合酸消化 液,继续消化,直至无色透明为止。加热除去多余的硝酸,待溶液至2mL~3mL时取下冷却,用去离子 水洗至25mL容量瓶中,加水定容至刻度。同时做空白试验,空白试验除不加试样外,其他操作与试样 相同。 4.4.2.2 湿式消解法 称取试样2.5g(精确至0.0001g)于锥形瓶或高型烧杯中,放数粒玻璃珠并加10mL混合酸,置于 电炉上消解,若变棕黑色,再加混合酸,直至冒白烟,消化液呈无色透明或略带黄色,冷却后用滴管将试 样消化液洗入或过滤入(如有不溶性残渣)25mL容量瓶中,用水少量多次洗涤锥形瓶或高型烧杯,洗 液合并于容量瓶中并定容至刻度,混匀备用;同时做空白试验,空白试验除不加试样外,其他操作与试样 相同。 4.4.3 测定 4.4.3.1 测定条件 参数见表1。 表1 测定条件参数 元素 波长/nm 光源 火焰标准系列浓度 范围/(μg/mL)稀释溶液 铁 248.3 空心阴极灯 铅