ICS71.100.70 Y42 中华人民共和国国家标准 GB/T31858—2015 眼部护肤化妆品中禁用水溶性着色剂 酸性黄1和酸性橙7的测定 高效液相色谱法 Simultaneousdeterminationofacidyellow1andacidorange7prohibitedusing ineyecosmetics—Highperformanceliquidchromatography 2015-07-03发布 2016-02-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会发布前 言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由中国轻工业联合会提出。 本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会(SAC/TC257)归口。 本标准起草单位:杭州市质量技术监督检测院、上海市日用化学工业研究所、中国计量学院、德清县 质量技术监督检测中心。 本标准主要起草人:李玮、屠海云、俞晓平、沈群、芮昶、沈敏、肖海龙、杜晓婷、夏钟兴、赵凯、潘向荣、 王啸、周敏、孙岚、陈美春、阮小娇、施华标、黄建萍。 ⅠGB/T31858—2015 引 言 本标准中的被测物质是我国《化妆品卫生规范》规定的眼部护肤化妆品中禁用物质,不得作为眼部 化妆品生产原料即组分添加到眼部护肤化妆品中。如果技术上无法避免禁用物质带入眼部化妆品时, 则化妆品成品应符合《化妆品卫生规范》对眼部化妆品的一般要求,即在正常及合理的、可预见的使用条 件下,不得对人体健康产生危害。 目前我国尚未规定这些物质的限量值,本标准的制定,仅对眼部护肤化妆品中测定这些物质提供检 测方法。 ⅡGB/T31858—2015 眼部护肤化妆品中禁用水溶性着色剂 酸性黄1和酸性橙7的测定 高效液相色谱法 1 范围 本标准规定了用液相色谱法测定膏霜、乳液、液体类眼部护肤化妆品中禁用的水溶性着色剂酸性黄 1、酸性橙7的测定方法。 本标准适用于眼部护肤化妆品中禁用水溶性着色剂酸性黄1和酸性橙7的测定,不适用于测定含 有酸性黄1和酸性橙7的色淀的眼部护肤化妆品。 本标准方法检出限为1.5mg/kg,定量限为5.0mg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 方法提要 膏霜、乳液类眼部化妆品用三氯甲烷分散后,用水为溶剂进行提取;液体类眼部化妆品直接用水定 容,然后用配有二极管阵列检测器(DAD)的液相色谱仪检测,外标法定量。 4 试剂和材料 除非另有说明,所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682中规定的一级水。 4.1 三氯甲烷。 4.2 乙酸铵。 4.3 甲醇:色谱纯。 4.4 着色剂标准品:酸性黄1和酸性橙7,纯度不小于99.0%,分子式、相对分子质量、着色剂索引号、 CAS号、结构式参见附录A。 4.5 标准储备溶液:准确称取1g(精确至0.0001g)着色剂标准品(4.4)至1000mL容量瓶中,用水溶 解并定容,配制成1000mg/L的单个标准储备液,保存在棕色瓶中,4℃保存。 4.6 标准工作溶液:分别移取适量的标准储备溶液,配制成0.5mg/L,2.0mg/L,10.0mg/L,50.0mg/L, 100.0mg/L浓度的混合标准工作溶液,现配现用。 4.7 乙酸铵缓冲溶液:称取1.54g乙酸铵(4.2)至1000mL容量瓶中,加水溶解并定容,所用溶剂和溶 液分析前过0.45μm滤膜并用超声脱气。 5 仪器和设备 5.1 高效液相色谱仪,配二极管阵列检测器或紫外检测器。 1GB/T31858—2015 5.2 高速离心机。 5.3 超声波清洗仪。 5.4 漩涡混合仪。 5.5 分析天平:感量分别为0.0001g和0.001g。 5.6 微孔滤膜:0.45μm。 6 分析步骤 6.1 样品处理 6.1.1 膏霜、乳液类眼部化妆品:称取1.0g(精确到0.001g)样品于50mL离心管中,加入5mL三氯 甲烷(4.1),涡漩振荡至样品分散均匀,准确加入10.00mL水,漩涡振荡5min,6500r/min离心 10min,上层清液经0.45μm微孔滤膜(5.6)过滤,滤液以待进样。 6.1.2 液体类眼部化妆品:准确称取1.0g(精确到0.001g)样品于10mL容量瓶中,用水定容至刻度, 混匀后经0.45μm微孔滤膜(5.6)过滤,滤液以待进样。 6.2 测定 6.2.1 液相色谱分析参考条件 液相色谱分析参考条件如下: a) 色谱柱:C18柱(250mm×4.6mm,i.d.5μm)或其他效果等同的色谱柱; b)柱温:30℃; c)进样量:10μL; d)流动相:甲醇,乙酸铵缓冲溶液(4.7); e)流速:1.0mL/min; f)检测波长:240nm; g)梯度洗脱条件见表1。 表1 梯度洗脱条件 步骤时间 min甲醇 %乙酸铵缓冲溶液 % 0 0.00 30 70 1 2.00 30 70 2 9.00 95 5 3 12.50 95 5 4 13.00 30 70 5 15.00 30 70 6.2.2 标准工作曲线绘制 用配制的标准工作溶液(4.6)绘制以标准工作溶液中被测组分峰面积为纵坐标,标准工作溶液浓度 为横坐标的标准工作曲线。水溶性着色剂酸性黄1和酸性橙7混合标准物质色谱图和标准样品光谱图 参见附录B。 2GB/T31858—2015 6.2.3 试样测定 将试样(6.1)按色谱条件(6.2.1)进行测定,外标法定量,样品溶液中的被测物的响应值应在标准曲 线线性范围内,超出线性范围则应稀释后再进样测定。 6.2.4 定性确证 液相色谱仪对样品进行定性测定,进行样品测定时,如果检出酸性黄1和酸性橙7的色谱峰的保留 时间与标准品相一致,并且在扣除背景后的样品色谱图中,两种物质的可见吸收图谱与标准品的可见吸 收图谱一致,则可初步认定样品中存在被测物。必要时,阳性样品参考附录C方法进行确证。 6.3 空白试验 除不称取样品外,均按上述测定条件和步骤进行。 6.4 平行试验 按以上步骤,对同一试样进行平行试验测定。 7 结果计算 试样中着色剂的含量按式(1)计算: w=ρ×V×1000 m×1000…………………………(1) 式中: w———样品中着色剂的质量分数,单位为毫克每千克(mg/kg); ρ———根据标准曲线计算所得样液中着色剂的质量浓度,单位为毫克每升(mg/L); V———定容体积,单位为毫升(mL); m———称样量,单位为克(g)。 8 回收率和精密度 在添加浓度25mg/kg~1000mg/kg范围内,回收率在83.1%~98.8%之间,相对标准偏差小于 8.4%。 9 允许差 在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。 3GB/T31858—2015 附 录 A (资料性附录) 酸性黄1和酸性橙7的分子式、相对分子质量、着色剂索引号、CAS号、结构式 酸性黄1和酸性橙7的分子式、相对分子质量、着色剂索引号、CAS号、结构式见表A.1。 表A.1 酸性黄1和酸性橙7的分子式、相对分子质量、着色剂索引号、CAS号、结构式 序号着色剂名称 分子式 相对分子质量着色剂索引号CAS号 结构式 1 酸性黄1C10H4N2Na2O8S358.19 CI10316846-70-8 2 酸性橙7C16H11N2NaO4S350.32 CI15510633-96-5 4GB/T31858—2015 附 录 B (资料性附录) 标准物质液相色谱图和光谱图 说明: 1———酸性黄1(5.35min); 2———酸性橙7(10.89min)。 图B.1 水溶性着色剂酸性黄1和酸性橙7的混合标准样品色谱图 a) 酸性黄1 图B.2 水溶性着色剂酸性黄1和酸性橙7的标准样品光谱图 5GB/T31858—2015